日本語 中国（简体） English 間葉系幹細胞培養用AOF培地 商品名：R:STEM Medium for hMSC High Growth（Ref. No. EM1-500） 細胞治療製品及び遺伝子治療製品の製造時に使用する補助材料 一般要求事項 R:STEM Medium for hMSC High Growth（Ref. No. EM1-500） 認証された製品は日本国内で製造されたものに限られます ロート製薬オリジナル完全AOF培地「R:STEM」が国内でFIRMマーク認証第一号を取得 5月17日に認証授与式が開催されました。詳細はこちら 血清等に起因するウイルス等のリスクを低減 ヒト・動物由来原料を含まない EVs等による細胞の性質変化のリスクを低減 培地中にEVsを含まない 細胞増殖能の低下等、細胞への毒性を低減 抗生物質を含まない ロットチェックの手間を軽減 化学定義可能な成分を使用しているためばらつきが少ない サプリメントの添加等、前処理の手間を軽減 Ready-to-use培地で解凍後すぐに使用可能 AOF培地について 培地製造に際する各工程の品質を徹底管理 特長 ISO 20399を適用規格とするFIRMマーク認証を取得 再生医療等製品材料適格性確認書取得済み ヒト・動物由来原料不含の無血清培地 初代培養可能 hMSCの優れた培養性能（脂肪由来・臍帯由来） ロット間差が小さい 培地中のEVs量が検出限界以下 抗生物質を含まない Ready-to-use培地で解凍後すぐに使用可能 培地中に含まれるEVs量の測定 結果 R:STEM（EM1-500）中のEVs量は検出限界以下である ピンチアウトで拡大 R:STEM（EM1-500）または市販Xeno-free培地中に含まれるEVs量をCD9 / CD63 ELISA kitにて測定した。 (Mann-Whitney U test, *p<0.05) 細胞培養の安定性 結果 R:STEM（EM1-500）はロット差が小さく細胞培養時のばらつきが最小限に抑えられる ピンチアウトで拡大 ピンチアウトで拡大 脂肪由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）3ロットでPassage 2からPassage 4まで培養し、Passage 4の細胞について経時的に算出した細胞集団倍加数（population doubling level: PDL）、細胞倍化時間（population doubling time:PDT）で細胞増殖能を評価した。 脂肪由来hMSCsの細胞増殖試験 結果 R:STEM（EM1-500）は脂肪由来hMSCsを増殖させる ピンチアウトで拡大 ピンチアウトで拡大 脂肪由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）または市販AOF培地、市販Xeno-free培地を用いてPassage 2からPassage 4まで連続的に培養し、経時的に算出した細胞集団倍加数(population doubling level: PDL)、細胞倍化時間(population doubling time: PDT)で細胞増殖能を評価し、細胞状態の観察を行った。 (Kruskal-Wallis test, n.s.) ピンチアウトで拡大 脂肪由来hMSCsのヒトMSC関連表面マーカーの解析 結果 R:STEM（EM1-500）で培養した脂肪由来hMSCsは 国際細胞治療学会のヒトMSCの基準を満たしている ピンチアウトで拡大 ピンチアウトで拡大 脂肪由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）でPassage 2からPassage 4まで培養し、Passage 4の細胞についてflow cytometryを用いて国際細胞治療学会の定めるMSC関連表面マーカー（陽性マーカー CD73, CD90, CD105:＞95％、陰性マーカー CD11b, CD34, CD45, HLADR:＜2％）を解析した。 脂肪由来hMSCsの分化能の検討 結果 R:STEM（EM1-500）で培養した脂肪由来hMSCsは 3方向分化能を有する ピンチアウトで拡大 脂肪由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）でPassage 2からPassage 4まで培養し、Passage 4の細胞について脂肪・骨・軟骨細胞への分化誘導を行った。 分化度はオイルレッドO染色、アリザリンレッド染色、アルシアンブルー染色により評価した。 脂肪由来hMSCsの核型解析 結果 R:STEM（EM1-500）は脂肪由来hMSCsの染色体へ影響を与えない ピンチアウトで拡大 脂肪由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）でPassage 2からPassage 4まで培養し、Passage 4の細胞についてG-band分染法で染色後、ランダムに8細胞についてカリオタイピングを行った。 脂肪由来hMSCsのEVs産生能の評価 結果 R:STEM（EM1-500）は脂肪由来hMSCsのEVs産生能を促進させる ピンチアウトで拡大 ピンチアウトで拡大 脂肪由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）または市販AOF培地でPassage 2からPassage 4まで培養し、Passage 4の細胞について培養を行った際の培養上清中に含まれるEVs量をCD9 / CD63 ELISA kit、ExoCounterにて測定した。 (Mann-Whitney U test, *p<0.05) 脂肪由来hMSCsのHGF産生能の評価 結果 R:STEM（EM1-500）は脂肪由来hMSCsのHGF産生能を促進させる ピンチアウトで拡大 脂肪由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）または市販AOF培地、市販Xeno-free培地でPassage 2からPassage 4まで培養し、Passage 4の細胞について培養を行った際の培養上清中に含まれるHGF量をHGF ELISA kitにて測定した。 (Steel’s test, *p<0.05) 臍帯由来hMSCsの細胞増殖試験 結果 R:STEM（EM1-500）は臍帯由来hMSCsを増殖させる ピンチアウトで拡大 臍帯由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）または市販AOF培地、市販Xeno-free培地を用いてPassage 2からPassage 4まで連続的に培養し、経時的に算出した細胞集団倍加数(population doubling level: PDL) で細胞増殖能を評価 し、細胞状態の観察を行った。 (Kruskal-Wallis test, n.s.) ピンチアウトで拡大 臍帯由来hMSCsのヒトMSC関連表面マーカーの解析 結果 R:STEM（EM1-500）で培養した臍帯由来hMSCsは 国際細胞治療学会のヒトMSCの基準を満たしている ピンチアウトで拡大 ピンチアウトで拡大 臍帯由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）でPassage 2からPassage 4まで培養し、Passage 4の細胞についてflow cytometryを用いて国際細胞治療学会の定めるMSC関連表面マーカー（陽性マーカー CD73, CD90, CD105:＞95％、陰性マーカー CD11b, CD34, CD45, HLADR:＜2％）を解析した。 臍帯由来hMSCsのEVs産生能の評価 結果 R:STEM（EM1-500）は臍帯由来hMSCsのEVs産生能を促進させる ピンチアウトで拡大 ピンチアウトで拡大 臍帯由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）または市販AOF培地でPassage 2からPassage 4まで培養し、Passage 4の細胞について培養を行った際の培養上清中に含まれるEVｓ量をCD9 / CD63 ELISA kit、ExoCounterにて測定した。 (Mann-Whitney U test, *p<0.05) 臍帯由来hMSCsのHGF産生能の評価 結果 R:STEM（EM1-500）は臍帯由来hMSCsのHGF産生能を促進させる ピンチアウトで拡大 臍帯由来hMSCsをR:STEM（EM1-500）または市販AOF培地、市販Xeno-free培地でPassage 2からPassage 4まで培養し、Passage 4の細胞について培養を行った際の培養上清中に含まれるHGF量をHGF ELISA kitにて測定した。 (Steel’s test, *p<0.05) ※掲載のデータは全て当社で取得したものです。 お問い合わせ／ご注文